Главная


http://ruall.com/personal/6063-subbotnik-%E2%80%93-nasledie-proshlogo.html - RuAll.com
Деревянные окна

Реакция агглютинации лейкоцитов. Оценка метода

По чувствительности реакция агглютинации превосходит цитотоксический тест и связывание комплемента тромбоцитами. Высокой чувствительности противостоит низкая воспроизводимость результатов (около 85%). Поэтому реакция агглютинации больше не находит применения при оценке тканей на совместимость (выявления HLA-антигенов). Для обнаружения цитотоксических антилейкоцитарных антител используется метод иммунофлюоресценции, доступный, правда, для ограниченного числа лабораторий. PAJI все же должна входить в число методов, используемых в серодиагностике лабораториями без иммунофлюоресцентного оснащения.

РАЛ применяют в следующих случаях:

— выявление причин лихорадочных посттрансфузионных реакций. Агглютинирующие анти-НLА-антитела могут встречаться независимо от цитотоксических анти-НLА-антител и вызывать посттрансфузионные реакции (агглютинирующие, антилейкоцитарные антитела у реципиента);

— определение специфических антигранулоцитарных антител, которые могут быть причиной лихорадочных посттрансфузионных реакций или так называемого эффекта замещения после переливания гранулоцитов;

— выявление антигранулоцитарных аутоантител, обладающих в большинстве случаев групповой специфичностью. Переливание гранулоцитарной массы под контролем специфичности антител;

— выявление HLA-независимых гранулоцитспецифических антигенов; в настоящее время вытесняется иммунофлюоресцентным методом.

РАЛ с дефибринированной кровью отличается худшей воспроизводимостью, чем при использовании крови, обработанной ЭДТА, поскольку в первом случае чаще наблюдаются ложноположительные результаты. РАЛ в капиллярах гораздо менее подвержена ошибкам, учитывая высокую чувствительность метода, его рекомендуют для выявления трудно обнаруживаемых HLA-антигенов. РАЛ пригодна как метод скрининга агглютинирующих антител. В агглютинационной пробирке смешивают 2 капли суспензии лейкоцитов и 2 капли сыворотки (около 0,05 мл). Этот вариант РАЛ не требует специального оснащения. После 90 минут инкубации при 37°С надосадочную фракцию отбрасывают. В каждую пробирку вносят 1 каплю 6% уксусной кислоты и слегка покачивают пробирку (гемолиз остаточных эритроцитов). Капельной пипеткой наносят одну каплю смеси на обезжиренное этанолом предметное стекло и делают мазок. Микроскопируют при 60—100-кратном увеличении.